evaluación de terapias naturales para …

evaluación de terapias naturales para ...

Abstracto

PREGUNTA DE ESTUDIO Puede resveratrol y epigalocatequina-3-galato (EGCG) inhibir el crecimiento y la supervivencia de las lesiones de endometriosis como en vivo en un modelo de ratones BALB / c de la endometriosis, y in vitro en cultivos primarios de células epiteliales endometriales humanas (EECS)?

Lo que se sabe YA La endometriosis es una condición común asociado con la infertilidad y dolor pélvico en las mujeres en edad reproductiva. Resveratrol y EGCG dos polifenoles con propiedades anticancerígenas y antioxidantes que se han propuesto como terapias naturales para tratar la endometriosis.

ESTUDIO DE DISEÑO, tamaño, duración femenino ratones BALB / c cincuenta y seis de 2 meses de edad, se sometió a la inducción quirúrgica de la endometriosis. Los tratamientos con resveratrol o EGCG comenzaron 15 días después de la cirugía y se continuó durante 4 semanas. biopsias humanas fueron tomadas con un metal Novak cureta de la pared posterior del útero a partir de 16 pacientes con endometriosis no tratada y 15 controles que se sometieron a laparoscopia diagnóstica para la infertilidad.

RESULTADOS PRINCIPALES En el modelo de ratón, ambos tratamientos redujeron significativamente el número medio (PAG lt; 0,05 versus control) y el volumen de las lesiones establecidas (PAG lt; 0,05 versus control). Tratamientos proliferación celular constantemente estadísticamente significativamente disminuida (resveratrol PAG lt; 0,01 y EGCG PAG lt; 0,05, versus control), reducción de la densidad vascular (resveratrol PAG lt; 0,01 y EGCG PAG lt; 0,001, frente al control) y el aumento de la apoptosis en las lesiones (resveratrol PAG lt; 0,01 y EGCG PAG lt; 0,05, versus control). Ambos compuestos reducción inducida en la proliferación CEE humana (PAG lt; 0,05 frente a basal) y aumento de la apoptosis (PAG lt; 0,05 frente a basal) en cultivos primarios.

LIMITACIONESIn vitro estudios sólo se llevaron a cabo en células epiteliales de endometrio eutópico humano.

palabras clave

Introducción

La endometriosis es uno de los trastornos benignos más comunes y afecta a un 6-10% de las mujeres en edad reproductiva (Giudice y Kao, 2004). La enfermedad se define como la presencia de glándulas endometriales y estroma fuera de la cavidad uterina y los pacientes con endometriosis sufren a menudo de la dismenorrea, dispareunia, disuria y dolor abdominal o pélvica crónica, así como la infertilidad, que resulta en una calidad limitada de la vida (Giudice y Kao, 2004). A medida que la enfermedad es dependiente de estrógenos, los tratamientos médicos están dirigidas principalmente a la regulación negativa de la producción de estrógenos por los ovarios (Valle y Sciarra, 2003; Mihalyi et al.. 2006). Sin embargo, es bien conocido que las terapias médicas actuales disponibles para el tratamiento de endometriosis tienen efectos adversos que limitan su uso a largo plazo. Por otra parte, la recurrencia de la enfermedad después del cese de la terapia es muy frecuente y la mayoría de los pacientes tienen que extender el tratamiento para mantener un ambiente hipoestrogénico hasta la concepción. Por lo tanto, es importante seguir buscando nuevos tratamientos seguros y eficaces a largo plazo.

El objetivo de nuestro estudio fue evaluar los efectos de estos dos compuestos naturales ambos en vivo y in vitro en el crecimiento y la supervivencia de la endometriosis experimental en un modelo de ratón BALB / c y en cultivos primarios de células humanas endometriales epiteliales (EECS), respectivamente.

Materiales y métodos

animales

Inducción quirúrgica de la endometriosis y el tratamiento

Después de la cirugía, los animales fueron asignados al azar a experimentos para probar el efecto de resveratrol (R5010, Sigma-Aldrich Co. ™ Saint Louis, MO, EE.UU.), o EGCG (E4268, Sigma-Aldrich). El tratamiento se inició 2 semanas después de la cirugía y se continuó durante 4 semanas. Los ratones fueron controlados diariamente y no hay evidencia de toxicidad se observó basan en el peso corporal, consumo de alimentos, el aseo niveles de comportamiento o actividad en comparación con los controles respectivos. Además de los ciclos de estro fueron seguidos citológicamente durante los tratamientos para garantizar que no interfieren con la actividad reproductiva. No se detectaron diferencias entre los controles y los ratones tratados (datos no mostrados).

tratamiento Resveratrol

EGCG tratamiento

La evaluación de las lesiones de endometriosis similar

La inmunohistoquímica para la proliferación de antígeno nuclear de células y CD34

ensayo de TUNEL

La cuantificación de factor de crecimiento endotelial vascular

Colección de biopsias humanas

Aislamiento y cultivo de EECs

Ensayo de proliferación celular en cultivos primarios

ensayo de apoptosis en cultivos primarios

análisis estadístico

resultados

Efecto del resveratrol y EGCG en el crecimiento del endometrio lesión similar

El efecto de resveratrol y EGCG en el número (UN ) Y el volumen (segundo ) De las lesiones de endometriosis similar. Los ratones con endometriosis inducida quirúrgicamente se trataron todos los días a partir del día posterior a la cirugía 15 con: (i) el resveratrol (Res I 10 mg / kg-Res II 25 mg / kg) o vehículo (control); (Ii) EGCG (EGCG I 20 mg / kg-EGCG II 100 mg / kg) o vehículo (control). Después de 4 semanas de tratamiento, los ratones se sacrificaron y las lesiones establecidas se contaron y se midieron con calibradores. se calculó por ratón para cada grupo de tratamiento, el número de lesiones establecidas (0 mm 3 GT). El volumen de cada lesión se calculó con la fórmula V = (4/3) πr 2 R. valores de volumen de todas las lesiones desarrolladas por ratón fueron promediados y la media se calculó para cada grupo de tratamiento. Los resultados se expresan como media ± SEM. *PAG lt; 0,05 / **PAG lt; 0,01 versus control. norte = 8 (control Res), 10 (Res I), 10 (Res II), 8 (control EGCG), 9 (EGCG I), 6 (EGCG II). (do ) Las fotografías que ilustran las lesiones de endometriosis similar de (a) el control de Res, (b) Res I, control de EGCG (c) Res II, (d), (e) EGCG I y (f) se muestran EGCG II. puntas de flechas negras indican las lesiones establecidas en el final de los tratamientos.

Efecto de los tratamientos de resveratrol y EGCG sobre la proliferación celular y la apoptosis en las lesiones de endometriosis como

Efecto del resveratrol y EGCG en los niveles de VEGF y la densidad vascular

Para determinar la densidad vascular, los vasos sanguíneos en las lesiones de endometriosis como se inmunotiñeron con el anticuerpo CD34 y el porcentaje de área vascular se cuantificó (Fig. 4). En ambos casos, el efecto del tratamiento inhibidor fue claramente asociada con una importante disminución en la densidad vascular (Res I / II PAG lt; 0,01 versus control; EGCGI / II PAG lt; 0.001 versus control).

Efecto del resveratrol y EGCG sobre la densidad lesión vascular endometriósico similar. Los ratones con endometriosis inducida quirúrgica se trataron todos los días a partir del día posterior a la cirugía con 15: (UN ) Resveratrol (Res I 10 mg / kg-Res II 25 mg / kg) o vehículo (control), (segundo ) EGCG (EGCG I 20 mg / kg-EGCG II 100 mg / kg) o vehículo (control). Después de 4 semanas de tratamiento, los ratones se sacrificaron y las lesiones fueron disecados de distancia, de la fijada con formalina, embebido en parafina y se cortan en secciones. Los vasos se identificaron utilizando CD34 tinción del endotelio vascular y cuantificados como porcentaje de área. Los resultados se expresan como media ± SEM. **PAG lt; 0,01 / ***PAG lt; 0.001 versus control. norte = 5 (Res control), 6 (Res I), 6 (Res II), 5 (control EGCG), 6 (EGCG I), 5 (EGCG II). (do ) (Ii) Res I, (iii) Res II, (iv) control de EGCG, (v) EGCG I y (vi) se muestran fotomicrografías de CD34 inmunotinción de (i) el control Res, EGCG II. Como control negativo (recuadro (iii) y (vi)) se utilizó una inmunoglobulina de la misma clase y la concentración que el anticuerpo primario. Ampliación: 400 ×.

Efectos del resveratrol y EGCG sobre la proliferación y la apoptosis CEE

Los efectos de diferentes concentraciones de resveratrol y EGCG sobre la proliferación CEE se muestran en la Fig. 6 A y B. Después de la exposición a 50 y 100 mM de resveratrol, la EECs mostró un porcentaje significativamente menor de la proliferación celular (PAG lt; 0,05 y PAG lt; 0,01, respectivamente, frente a basal) en cultivos de ambas mujeres de control (Fig. 6 A (i)) y pacientes con endometriosis (Fig. 6 B (i)). tratamiento EGCG mostró una inhibición significativa con todas las concentraciones ensayadas (40, 80 y 100 mM), con exclusión de la más baja (20 mM), que no tuvo ningún efecto significativo sobre la proliferación celular basal (Fig. 6 A (ii) -B (ii) ). El mismo efecto significativo se observó en los cultivos de pacientes con endometriosis (PAG lt; 0.05, PAG lt; 0.01, PAG lt; 0,001 frente a basal, respectivamente) y de las mujeres de control (PAG lt; 0,01 frente a basal).

Los efectos de diferentes concentraciones de resveratrol y EGCG sobre la apoptosis CEE se muestran en la Fig. 7 A y B. Como complemento a los resultados obtenidos a partir de experimentos de proliferación celular, resveratrol 50 y 100 mM aumento de la apoptosis en CEE de las mujeres de control (PAG lt; 0,05 y PAG lt; 0,01 frente a basal, respectivamente). Sin embargo, en la endometriosis culturas CEE, 100 mM era la única concentración que mostró un efecto significativo (PAG lt; 0,01 frente a basal). Respecto al tratamiento EGCG, 40, 80 y 100 mM dosis ensayados mostraron un efecto significativo sobre el crecimiento endometrial mejora de la apoptosis en CEE de los sujetos control (40/80 mu M PAG lt; 0,05 frente a basal; 100 M PAG lt; 0,01 frente a basal), así como en CEE de pacientes con endometriosis (PAG lt; 0,01 frente a basal).

Discusión

El tratamiento de los síntomas de la endometriosis asociada por lo general requiere cirugía, así como la intervención médica (Crosignani et al.. 2006). A pesar de que los actuales tratamientos médicos disponibles no son curativos per se. que son uno de los pilares de la supresión del dolor y la regresión de las lesiones en las mujeres que padecen esta patología. Sin embargo, los esfuerzos se siguen enfocados en la mejora y promoción de nuevos tratamientos con mayor eficacia y menos efectos secundarios.

Una mejor comprensión de los mecanismos básicos de acción de EGCG y resveratrol, así como es necesaria su biodisponibilidad para determinar la utilidad potencial de estos compuestos naturales como la endometriosis agentes preventivos.

Dato suplementario

PUESTOS RELACIONADOS

  • Los remedios naturales, remedios naturales …

    7 remedios caseros para el carcinoma basocelular ¿Qué causa el cáncer de piel (carcinoma basocelular) síntomas? El cáncer de piel es uno de los principales cánceres diagnosticados en los Estados Unidos. El cáncer de piel es a menudo …

  • Terapias naturales caballo, dolor de espalda en los tratamientos de caballos.

    Identificar el dolor de espalda en caballos en el blog de hoy voy a hablar de dolor de espalda en los caballos. Por desgracia, es algo que es común, y que a menudo pasa inadvertida. Es algo que …

  • Terapias naturales para la alergia …

    Tratar con los síntomas de alergia durante todo el año puede tomar un peaje considerable en su vida, por lo que es difícil desempeñarse en el trabajo y en el juego. medicamentos para la alergia pueden ayudar, pero los efectos secundarios …

  • terapia natural del VPH, el tratamiento del virus VPH.

    efectos protectores de los extractos de té verde (Polyphenon E y el EGCG) en lesiones cervicales humanos. Eur J Cancer Prev. 2003. Departamento de Obstetricia y Ginecología de la Facultad de Medicina de la Católica …

  • Tratamiento natural para el aceite de ricino …

    Se aconseja el uso de aceite de ricino para el tratamiento de los fibromas. Los fibromas influyen en la fertilidad y pueden hacer que el aborto involuntario en las mujeres. A veces no se necesita ningún tratamiento. Por lo general, son …

  • Pérdida del cabello tratamientos naturales, aceites esenciales y pérdida de cabello.

    Para la mayoría de los hombres y las mujeres, la pérdida del cabello es un problema embarazoso y sensible. También es una condición que afecta a mucha más gente que es de conocimiento general, que afecta a incluso los adolescentes jóvenes en extrema …

También te podría gustar...